Россия
Россия
Россия
Россия
Россия
В современном исследовании эволюционных и таксономических связей рыб митохондриальный геном используется из-за своего небольшого размера и высокой скорости мутаций, по сравнению с ядерным геномом. Исследование мтДНК помогает выявить географические и генетические закономерности, а также – происхождение видов, пород и разновидностей. В настоящей работе было изучено генетическое разнообразие стада сарбоянского карпа северного типа с использованием фрагмента COX1 митохондриальной ДНК, а также проанализированы филогенетические связи между современными породами, подвидами и видами рода Cyprinus. У проанализированных гаплотипов сарбоянского карпа, разводимого в Мошковском районе в хозяйстве ООО «ЭКО-ПАРК» выявлены относительно невысокие показатели генетического полиморфизма. Филогенетический анализ, проведенный на основе собственных гаплотипов и гаплотипов, взятых из международной базы данных NCBI, позволяет утверждать, что сарбоянский карп представляет собой глубоко гибридную группировку, что подтверждает известные данные о происхождении данной породы. Исследование медианной сети гаплотипов показало, что гаплотипы карпа и дикого сазана образуют связанные гаплогруппы через один общий гаплотип. Сарбоянский карп представлен тремя гаплотипами, 75% из которых принадлежат к звездообразной структуре (H1), а оставшиеся 25% представлены различными породами карпа и сазана, как из Евразии, так и из Северной Америки.
митохондриальная ДНК, цитохром оксидаза I, филогенетическая связь, гаплотип, сарбоянский карп
Введение
Прудовое рыбоводство в Западной Сибири развивается в специфических условиях резко континентального климата с длительными зимними периодами. Водоемы на 6-7 месяцев покрываются льдом. Диапазон суммы положительных температур от 10oC составляет 1600-2400 градусо-дней. Благоприятный период для выращивания карпа (Cyprinus carpio L.) составляет 90-100 дней. На территории Западной Сибири до 40-х годов ХХ века сазан, а в особенности его культурная форма (карп), не выживали, так как не могли акклиматизироваться к естественным условиям окружающей среды [1]. Только благодаря упорной селекционной работе появилась возможность использовать в аквакультуре одомашненные породы карпа [2].
Обыкновенный карп относится к отряду карпообразных (Cypriniformes) и семейству карповых (Cyprinidae), которое является самым многочисленным семейством среди пресноводных рыб. Этот вид обитает в пресноводных прудах, озерах и реках, редко встречается и солоноватых водах [3; 4]. За последние столетия карп был завезен на большинство континентов и в 59 стран, а также является одним из наиболее широко культивируемых видов рыб в мире [5; 6; 7]. Многочисленные подвиды, экологические формы были сформированы в результате географической изоляции, давления отбора, а также – накопления мутаций [6]. От своего дикого предка, сазана, одомашненный карп отличается морфологическими признаками, поведенческими, репродуктивными и физиологическими признаками [8; 9]. Помимо ценного источника белка карп также является важным декоративным объектом аквакультуры. Один из его ярких представителей карп кои, который, благодаря своему яркому окрасу и рисунку на чешуе, считается одним из самых популярных объектов рыборазведения [8].
Во многих природных водоемах, где обыкновенный карп был интродуцирован, он считается инвазивным видом, так как, по мнению ученых, может оказывать негативное воздействие на ихтиофауну водоемов [3; 10]. Его инвазивная активность имеет различные показатели в разных регионах обитания. Стоит отметить, что в некоторых странах обыкновенного карпа исключили из перечня инвазивных видов, так как он имеет промысловую ценность [2].
Для исследования генетической структуры и филогенетических связей карпа используются различные молекулярные маркеры и генетические инструменты. К ним относятся: случайная амплификация полиморфной ДНК (RAPD-маркеры), полиморфизм длины рестрикционного фрагмента (RLFP-маркеры), полиморфизм длины амплифицированного фрагмента (AFLP-маркеры), микросателлиты и анализ митохондриальная ДНК [11; 8; 12; 13].
Современный прогресс в изучении эволюционных, таксономических и филогенетических взаимоотношений рыб в настоящее время связывают c использованием молекулярно-генетических маркеров [14; 15; 16; 17; 19]. Митохондриальный геном используется для этих целей в связи с тем, что относительно ядерного генома мтДНК имеет небольшой размер, а также высокую скорость мутационных процессов [18]. Важно сказать о том, что мтДНК подходит только для реконструкции материнской филогении и непригодна для обнаружения гибридизации между филогеографическими линиями или подвидами [17; 16]. Тем не менее, мтДНК пригодна для лучшего понимания географических и генетических закономерностей, а также происхождения видов, пород и разновидностей [20; 17; 16].
Порода сарбоянского карпа была выведена путем обратного скрещивания амурского сазана с ропшинским карпом. Над созданием породы работали ученые В.А. Коровин и А.С. Зыбин (1987). Сарбоянский карп отличается повышенной способностью к адаптации, высокой плодовитостью, а также устойчивостью к гипоксии, что обуславливает жизнестойкость молоди на разных этапах развития [21]. Ранее порода включала в себя 3 типа: омский или степной, северный и красноозерский. Северный тип не был включен в породу, так как на момент регистрации племенного достижения северная популяция заболела краснухой. За короткий период (1990-2005 гг.) внутрипородные карпы краснозерского и омского типов были утрачены [2; 22]. В рыбоводном хозяйстве «ЭКО-ПАРК» Мошковского района Новосибирской области сохранились потомки северного типа сарбоянского карпа. Гибридизация с другими породами карпа не была отмечена, так как другой породы карпов в данной местности не выращивалось. В течение 20 лет северный тип сарбоянского карпа не подвергался массовому направленному отбору. В настоящее время работа ведется на исходном стаде, взятом для селекции из числа потомков сарбоянского карпа.
Целью нашей работы является исследование генетического разнообразия стада сарбоянского карпа северного типа, на основе фрагмента COX1 мтДНК, и анализ филогенетических связей между современными породами, подвидами и видами р. Cyprinus.
Объекты и методы исследований
Объектом исследования были самки и самцы сарбоянского карпа, рыбоводного хозяйства ООО «ЭКО-ПАРК» Мошковского района Новосибирской области. Пробы были взяты у 77 экз. самцов и самок. Материал для изучения собирали прижизненно. Фрагмент спинного плавника размером (15-20мм) отрезали и фиксировали в 96% этиловом спирте на местах сбора материала. ДНК экстрагировали из отдельно взятых особей с помощью 8%-ного раствора Chelex 100 resin (BioRad, США). Общую геномную ДНК выделяли с помощью Chelex 100. Выделенную ДНК хранили при температуре 4°C. Амплифификацию фрагмента гена СОХ1 мтДНК проводили в реакционной смеси объемом 20 мкл с использованием разработанных внешних праймеров 5'-TCAACCAACCACAAAGACATTGGCAC-3' Forward и 5'-TAGACTTCTGGGTGGCCAAAGAATCA-3' Reverse. Продукты реакции амплифификации разделяли методом электрофореза в 1%-ном агарозном геле в 1×ТАЕ-буфере, окрашенном бромистым этидием, и фотодокументировали. Полученные ПЦР-продукты очищали с помощью набора реактивов «Биосилика» (Россия). Секвенирование в прямом-обратном направлении проводили в компании «Евроген» (evrogen.ru). В итоге были получены последовательности длиной 566 нуклеотидных оснований. Нуклеотидные последовательности выравнивали с помощью алгоритма ClustalW и редактировали вручную в программе BioEdit v.7 [23].
Оригинальные последовательности нуклеотидов для каждой исследованной особи депонировали в международную базу данных GenBank (табл. 1). Для анализа полиморфизма митохондриальных последовательностей вычисляли следующие параметры: число полиморфных (сегрегирующих сайтов, S), число гаплотипов (h), гаплотипическое разнообразие (Hd) и нуклеотидное разнообразие (π). Все расчеты выполняли в программе DnaSP v.5.10 [24].
Филогенетический анализ последовательностей нуклеотидов проводили с помощью пакета программ MEGA v.6.06 [25]. Анализ генетической изменчивости и филогенетических связей проводили в программе dnsp5. Кроме собственных сиквенсов использовали сиквенсы из NCBI (табл. 1).
Результаты исследований и обсуждение
Популяция сарбоянской породы карпа из прудов Новосибирской области характеризуется невысокими показателями генетического полиморфизма по фрагменту (566 bp) гена CОХ1. Нужно отметить относительно высокое нуклеотидное и гаплотипическое разнообразие сарбоянского карпа. Это позволяет утверждать, что при селекционной работе со стадом использовали несколько генетически отличных самок, возможно различных породных линий (табл.1).
По данным автора породы В.А. Коровина, для селекции использовали рыб ропшинского карпа и амурского сазана из рыбхозов европейской части России.
Генетический полиморфизм и филогения. При анализе общего полиморфизма фрагментов CОХ1 мтДНК были обнаружены (как и предполагалось) относительно невысокие общие генетические показатели.
Таблица 1. Полиморфизм последовательностей гена COX1 мтДНК у сарбоянского карпа Мошковского рыбоводного хозяйства ООО «Эко-Парк»
Table 1. Polymorphism of sequences of the COX1 mtDNA gene in the Sarboyan carp of the Moshkovsky fish farm of “Eco-Park LLC”
|
Вид |
n |
S |
h |
Hd |
π |
k |
|
Сарбоянский карп |
77 |
3 |
4 |
0.374 |
0.0007 |
0.386 |
Примечание: *n – число образцов; S – число полиморфных (сегрегирующих сайтов); h – число гаплотипов; Hd – гаплотипическое разнообразие; π – нуклеотидное разнообразие; k – среднее число нуклеотидных различий (на сайт).
По данным Национального центра биотехнологической информации (National Center for Biotechnology Information), было построено NJ-дерево филогенетических отношений породы сарбоянского карпа внутри вида Cyprinus carpio, созданное на основе нуклеотидных последовательностей митохондриального фрагмента гена C0X1.
Таблица 2. Список использованных нуклеотидных последовательностей карповых рыб
Table 2. List of used nucleotide sequences of cyprinid fish
|
№№ п/п |
ННазвание
|
NCBI |
|
|
Cyprinus carpio изолят SWU183 |
MW649289.1 |
|
|
Cyprinus carpio voucher Fish242 |
ON097884.1 |
|
|
Jinbian carp Cyprinus carpio |
MH202953.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
OL457418.1 |
|
|
German mirror carp |
KP993139.1 |
|
|
Cyprinus carpio voucher Fish247 |
ON097801 |
|
|
Изолят Cyprinus carpio SWU021 |
MW649282 |
|
|
Cyprinus carpio изолят SWU079 |
MW649287 |
|
|
Cyprinus carpio изолят SWU013 |
MW649281 |
|
|
Cyprinus carpio изолят SWU154 |
MW649288 |
|
|
Cyprinus carpio изолят NEFC F16-042 |
MG570426.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
OM234682 |
|
|
Cyprinus carpio изолят SWU022 |
MW649283 |
|
|
Cyprinus carpio voucher LBPV-45304 |
JN988851.1 |
|
|
Венгерский карп |
KJ511883.1 |
|
|
Songpu mirror carp |
MW125611.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
KF856965.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят SWU078 |
MW649286.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Ccvs_1 |
MT571755.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'Guilin' |
MK291479.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят NEFC F16-248 |
MG570435.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят NEFC F16-117 |
MG570427.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'xingguonensis' (Xingguo red carp) |
JN105353.1 |
|
|
Cyprinus carpio haematopterus |
JN105354.1 |
|
|
Cyprinus carpio haematopterus (Yangtze River wild common carp) |
NC_018037.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'xingguonensis' |
KU146530.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Oujiang |
KP993136.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Pearl river |
MN793139.1 |
|
|
Cyprinus carpio haematopterus |
KP993138.1 |
|
|
Cyprinus carpio nudus |
KU301745.1 |
|
|
Cyprinus carpio haematopterus (Amur carp)
|
MK455071.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'wananensis' (glass red common carp) |
KF856964.1 |
|
|
Cyprinus carpio carpio |
KU146529.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Cc_4 |
MT571748.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
MK088487.1 |
|
|
Cyprinus carpio haematopterus (Huanghe carp) |
JX188254.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'wuyuanensis' (Wuyuan red carp) |
JN105357.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'wuyuanensis' (Wuyuan red carp) |
NC_018039.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'longfin' |
KF932266.1 |
|
|
Cyprinus carpio var. baisenensis |
MT780875.1 |
|
|
Cyprinus carpio voucher CCT |
KX254108.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Zujiang |
KP993137.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
KU159761.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Taiwan Jiayi |
MZ713633.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'color' (Oujiang color common carp) |
JX188253.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'color' (Oujiang color common carp) |
NC_018366.1 |
|
|
Cyprinus carpio 'koi' |
KJ511882.1 |
|
|
Cyprinus carpio voucher LodgeLab Ccarpio_1 |
KP013086.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
NC_001606.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Cc_1 |
MT571745.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
MN544290.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Cc_2 |
MT571746.1 |
|
|
Cyprinus rubrofuscus изолят DAN07-74.06 |
KP712147.1 |
|
|
Cyprinus carpio voucher NSMK-PI-0159098 |
OL674374.1 |
|
|
Cyprinus carpio |
KU050703.1 |
|
|
Cyprinus carpio carpio (Russian scattered scale mirror carp) |
JN105352.1 |
|
|
Cyprinus carpio carpio (Russian scattered scale mirror carp) |
NC_018035.1 |
|
|
Cyprinus carpio изолят Cc_7 |
MT571751.1 |
Рисунок 1. NJ-дерево филогенетических отношений породы сарбоянского карпа внутри вида Cyprinus carpio, построенное на основе нуклеотидных последовательностей фрагмента митохондриального гена C0X1
Figure 1. NJ is a tree of phylogenetic relationships of the Sarboyan carp breed within the species Cyprinus carpio, constructed on the basis of nucleotide sequences of a fragment of the mitochondrial gene C0X1
Филогенетический анализ, проведенный на основе собственных гаплотипов и гаплотипов, взятых из международной базы данных NCBI, позволяет утверждать, что сарбоянский карп представляет собой глубоко гибридную группировку (рис.1).
Филогенетические взаимоотношения, изученные методом построения медианной сети гаплотипов на основе нуклеотидных последовательностей гена COX1 мтДНК, показал, что рассматриваемые гаплотипы карпа и дикого сазана формируют две гаплогруппы, связанные через 1 гаплотип (рис.2). Сарбоянский карп представлен тремя гаплотипами, 75% из которых входят в звездообразную структуру (H1). Остальные 25% представлены различными породами карпа и сазана как Евразии, так и Северной Америки. Оставшиеся 3 гаплотипа (H15, Н16, Н17) карпа сарбоянской породы связаны с центральным гаплотипом через одну замену.
Рисунок 2. Медианная сеть гаплотипов на основе нуклеотидных последовательностей фрагмента митохондриального гена COX1. Черным выделены гаплотипы сарбоянской породы карпа
Figure 2. Median haplotype network based on nucleotide sequences of a fragment of the mitochondrial gene COX1. The haplotypes of the Sarboyan carp breed are highlighted in black
Таблица 3. Структура стада по гаплотипам
Table 3. Herd structure by haplotypes
|
Галотипы |
Количество особей, экз |
Структура, % |
|
H1 |
57 |
77,03 |
|
H15 |
1 |
1,35 |
|
H16 |
15 |
20,27 |
|
H17 |
1 |
1,35 |
|
Итого |
74 |
100 |
Для анализа генетического полиморфизма по фрагменту (566 bp) гена CОХ1 были выбраны 74 самки и самца в соотношении 1:2.
Гаплогруппа H1 является самой большой по количеству рыб, она состоит из 57 экз., что в процентном соотношении составляет 77,03%. Наименьшее количество особей представлено в гаплогруппах Н15 и Н17. В группу H16 входят 15 рыб, что занимает 20,27% от общего количества.
Обсуждение
Представленные результаты анализа фрагмента гена COX1 мтДНК сопоставимы с известными данными, опубликованными авторами породы в статьях, а также описанные в материалах селекционного достижения породы сарбоянский карп. Эта порода была выведена скрещиванием ропшинского карпа и амурского сазана. Сохранившаяся отводка имела по окончанию селекции 1/8 кровности амурского сазана [22]. В свою очередь, ропшинская порода была создана путем скрещивания в 1947 г. галицийского зеркального карпа с амурским сазаном и последующей направленной селекцией гибридов на протяжении 8 поколений. Во 2-ом поколении было осуществлено возвратное скрещивание амурского сазана, к 4-му поколению сформирована внутрипородная структура, включающая три группы: межлинейная (ММ), возвратная (ВВ), возвратно-межлинейная (ВМ), различающиеся между собой долей наследственности амурского сазана» (Голод, 2021). Кровность амурского сазана обеспечивала генетическую разнокачественность и разную адаптивную способность карпа к условиям существования. Это позволяло накопить большое количество гетерозигот в генотипах особей и избегать проявления инбридинга при внутрипородном скрещивании. Рыбы этой породы отличались высокой устойчивостью к кислородному голоданию и выживаемостью в зимний подледный период.
Именно поэтому при анализе по митохондриальной ДНК отмечается сходство между основными стадами карпа, взятыми для сравнения. В литературе по селекции карпа есть сведения, что в период его одомашнивания было два центра – это Китай и территория Восточной Европы – р. Дунай. Затем различные его модификации были адаптированы к разным климатическим условиях Земли.
Нужно отметить что из результатов генетического анализа видно, что кроме двух основных гаплотипов присутствуют посторонние гаплотипы карпов, возможно дикого типа, попавшие в племенную работу
Выводы
1. У проанализированных гаплотипов сарбоянского карпа, разводимого в Мошковском районе в хозяйстве ООО «ЭКО-ПАРК» выявлены относительно невысокие показатели генетического полиморфизма. Филогенетический анализ, проведенный на основе собственных гаплотипов и гаплотипов, взятых из международной базы данных NCBI, позволяет утверждать, что сарбоянский карп представляет собой глубоко гибридную группировку, что подтверждает известные данные о происхождении данной породы.
2. В изучаемом стаде было отмечено преимущество в численности в гаплогруппах Н15 и Н17.
3. Анализ медианной сети гаплотипов показал, что рассматриваемые гаплотипы карпа и дикого сазана формируют, связанные через 1 гаплотип, гаплогруппы. Сарбоянский карп представлен тремя гаплотипами, 75% из которых входят в звездообразную структуру (H1). Остальные 25% представлены различными породами карпа и сазана как Евразии, так и Северной Америки.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад в работу авторов: И.В. Морузи – идея статьи, корректировка текста ее окончательная проверка; Е.А. Елисеева– подготовка обзора литературы, подготовка статьи, проведение генетических исследований; Н.Н. Разоков – сбор и анализ данных, подготовка статьи; Н.А. Бочкарев – подготовка статьи, проведение генетических исследований; Е.В. Пищенко – сбор данных, подготовка статьи.
The authors declare that there is no conflict of interest.
Contribution to the work of the authors: I.V. Moruzi – the idea of the article, correction of the text, its final verification; E.A. Eliseeva – preparation of a literature review, preparation of the article, conducting genetic research; N.N.Razokov – data collection and analysis, preparation of the article; N.A.Bochkarev – preparation of the article, conducting genetic research; E.V. Pishchenko – data collection, preparation of the article.
1. Pishchenko E.V., Moruzi I.V., Zakonnova L.I., Vesnina L.V., Kropachev D.V. (2021). Microevolutionary processes in the creation of the Siberian species of carp // E3S Web of Conferences. 14-th International Scientific and Practical Conference on State and Prospects for the Development of Agribusiness, INTERAGROMASH 2021. Rostov-on-Don. С. 03006. https://doi.org/10.1051/e3sconf/202127303006.
2. Moruzi I.V., Pishchenko E.V., Beloysov P.V., Gart V.V., Kropachev D. A., (2021). Selection and breeding work with a modern population of Sarboyan carp. Серия конференций IOP: Earth and Environmental Science 937 (2021). DOI:https://doi.org/10.1088/1755-1315/937/3/032034.
3. Rahman M.M. (2015) Role of common carp (Cyprinus carpio) in aquaculture production systems. Frontiers in Life Science. № (3) 15. P. 399-410. Doihttps://doi.org/10.1080/21553769.2015.1045629.
4. Голод В.М. Породы рыб России// Генетика, селекция и воспроизводство рыб: сб. науч. тр. - СПб. 2002. С.19-25.
5. Xu, P., Jiang, Y., Xu, J., Li, J., Sun, X., (2016). Genomics in the common carp. Genomics in Aquaculture 16. Pp. 247. DOI:https://doi.org/10.1016/B978-0-12-801418-9.00010-X.
6. Liu, X., Ye, X., Liang, H., Zhou, L., Zhou, X., Zou, G., et al. (2019). Mitochondrial genome sequences reveal the evolutionary relationship among different common carp varieties (Cyprinus carpino L.). Meta Gene. № 19. Pp. 82-90. DOI:https://doi.org/10.1016/j.mgene.2018.11.001.
7. Saikia S.K., Das D.N. (2009). Feeding ecology of Common Carp (Cyprinus carpio L.) in a rice-fish culture system of the Apatani plateau (Arunachal Pradesh, India). Aquatic Ecology. № 43 (2). Pp. 559-568.
8. Xu J., Jiang Y., Zhao Z., Zhang H., Peng W., Dong C. et al., (2019). Patterns of Geographical and Potential Adaptive Divergence in the Genome of the Common Carp (Cyprinus carpio). Livestock Genomics. (10) 19. DOI:https://doi.org/10.3389/fgene.2019.00660.
9. Balon E. K. (1995) Origin and domestication of the wild carp, Cyprinus carpio: from Roman gourmets to the swimming flowers. Aquaculture (129) 91. Pp.3-48. DOI:https://doi.org/10.1016/0044-8486(94)00227-F.
10. Jackson M. C., Britton R. (2014). Divergence in the tropiс niche of sympatic freshwater invaders. Biological Invasion. 16(5). Pp.1095-1103. Doi:https://doi.org/10.1007/s10530-013-0563-3.
11. Napora Rutkowski L., Rakus K., Nowak Z., Pilarczyk A., Ostaszewska T., Irnazarow I. et al. (2017). Genetic diversity of common carp (Cyprinus carpio L.) strains breed in Poland based on microsatellite, AFLP, and mtDNA genotype data. Aquaculture. 2017. № (473) 17. Pp. 433-442. DOIhttps://doi.org/10.1016/j.aquaculture. 03.005.
12. Zhao Y., Zheng X., Zhu X. (2020). Genetic variation of common carp Cyprinus carpio L. in China based on mitochondrial COII gene. Aquaculture Reports. № (18) 20. p. 100462 DOI:https://doi.org/10.1016/j.aqrep.2020.100462.
13. J P., Zhang Y., Li C., Zhao Z., Wang J., Li J. (2012). High Throughput Mining and Characterization of Microsatellites from Common Carp Genome. International Journal of Molecular Sciences. № (8) 13. Pp. 9798-9807. DOI:https://doi.org/10.3390/ijms13089798.
14. Lin M., Zou J., Wang C. (2016). Complete mitochondrial genomes of domesticated and wild common carp (Cyprinus carpio L.). PubMed. № 27(1). 50-1. DOIhttps://doi.org/10.3109/19401736.2013.869690.
15. Xu P., Zhang X., Wang X., Li J., Liu G., Kuang Y et al. (2014). Genome sequence and genetic diversity of the common carp, Cyprinus carpio. Nat Genet. № (46). 14. Pp.1212-1219. DOI:https://doi.org/10.1038/ng.3098.
16. Toth B., Ashrafzadeh M.R., Khosravi R., Bagi Z., Feher M., Barsony P. et al, (2022). Insights into mitochondrial DNA variation of common carp Cyprinus carpio strains in the Centre of Carpathian Basin. Aquaculture. № (554) 22. DOIhttps://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2022.738116
17. Kohlmann K., Kersten P. (2013). Deeper insight into the origin and spread of European common carp (Cyprinus carpio carpio) based on mitochondrial D-loop sequence polymorphisms. Aquaculture. № (376-379) 13. Pp. 97. 104. DOIhttps://doi.org/10.3109/19401736.2013.869690
18. Fallahbagheri F., Dorafshan S., Pourkazemi M., Keivany Y. et al. (2013). Genetic analysis of wild common carp, Cyprinus carpio L. in the Anzali wetland, the Caspian Sea. Iranian Journal of Fisheries Sciences. № (1)13. 1. 11. DOIhttps://doi.org/10.22092/IJFS.2018.114256
19. Wang C., Liu H., Lou Z., Wang G., Zou G., Li X. (2010). Mitochondrial genetic diversity and gene flow of common carp from main river drainages in China. Freshwater Biol. (9) 11, 1905-1915. DOI:https://doi.org/10.1111/j.1365-2427.2010.02424
20. Ladoukakis E. D. and Zouros E. (2017). Evolution and Inheritance of Animal Mitochondrial DNA: Rules and Exceptions. J. Biol. Res-thessaloniki. 17. № (1). Pp. 1-7. DOIhttps://doi.org/10.1186/s40709-017-0060-4
21. Прудкой Д.С., Белоусов П.В., Морузи И.В. // Материалы науч.-прак. конф. «Проблемы биологии, зоотехнии и биотехнологии». 2020. С. 86-89.
22. Коровин В.А. Методы выведения и современное состояние сарбоянской породы карпа: Сборник: Селекция рыб. 1989. С. 195-210
23. Hall T.A. BioEdit: a user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT // Nucl. Ac. Symp. Ser. 1999. V. 41. P. 95-98.
24. Librado P., Rozas J. (2009). DnaSP v5: A software for comprehensive analysis of DNA polymorphism data // Bioinformatics. V. 25. Pp. 1451-1452.
25. Tamura K, Stecher G, Peterson D, Filipski A, Kumar S. (2013). MEGA6: Molecular Evolutionary Genetics Analysis version 6.0. Mol Biol Evol. Dec. 30(12). 2725-9. DOI:https://doi.org/10.1093/molbev/mst197.
